引物是基因工程的重要组成部分，通过选择合适的引物可以确定所需的基因序列，而限制酶则可以帮助我们实现基因的插入、删除和替换等功能。

在选择引物和限制酶时，需要考虑多种因素，如目标基因的长度和序列、所需的特定酶切位点、前后端序列和引物配对度等。此外，使用限制酶和引物时也需要注意实验体系的优化，以保证实验结果的准确性和重复性。